Ionty hořčíku, přidávané ve formě chloridu hořečnatého (MgCl2), jsou nezbytným kofaktorem pro aktivitu enzymu polymerázy během PCR. Příliš nízká koncentrace vede k slabé amplifikaci nebo úplnému selhání PCR, zatímco příliš vysoká koncentrace může podporovat nespecifickou amplifikaci. Ačkoli PCR Master Mixy obsahují dostatek MgCl2 pro běžné použití, mohou za určitých okolností vyžadovat zvýšenou koncentraci, například při kompenzaci inhibitorů PCR přítomných v extraktech DNA, které se mohou vázat na ionty Mg2+.
Roztok MgCl2 se používá k úpravě koncentrace Mg2+ v reakcích PCR. Lze jej použít v kombinaci s Master Mixy, jako jsou FIREPol® a HOT FIREPol® Master Mixy, nebo s jinými komerčními Master Mixy, PCR kuličkami a polymerázami. Ve většině aplikací je pro uspokojivý výtěžek optimální konečná koncentrace 1,5 mM MgCl2.
Podrobnosti
Bez exodeoxyribonukleáz, ribonukleáz a fosfatáz
Doporučené použití
Chlorid hořečnatý se obvykle používá v reakcích PCR. Koncentrace by měla být optimalizována podle kombinace Master Mixu, templátu a primeru.
Před použitím rozmrazte reagencie na ledu, roztoky promíchejte a odstřeďte, abyste získali maximální množství.
Obsah
Chlorid hořečnatý (25 mM MgCl2).
Skladování a stabilita
Běžné skladování při -20 °C. Dočasné skladování při pokojové teplotě nemá žádný škodlivý vliv na kvalitu tohoto činidla. Případně alikvotujte do sterilních zkumavek a zmrazte, aby se po otevření minimalizovala potenciální mikrobiální kontaminace.
Přepravní podmínky
Přepravuje se při pokojové teplotě.