| katalogové číslo: | HS-KIT |
| cena bez DPH: | 1 113,00 czk |
| cena vč. DPH: | 1 347 czk |
Sada pro extrakci DNA HotSHOT poskytuje uživatelům rychlou a spolehlivou metodu alkalické lýzy pro extrakci DNA v kvalitě PCR z široké škály tkání bohatých na DNA. Navrhované cílové tkáně zahrnují živočišné tkáně (od savců přes ryby až po bezobratlé živočichy), ačkoli tento protokol byl v řadě studií často úspěšně používán také k extrakci houbové, rostlinné a bakteriální DNA. Jedná se o poměrně surovou metodu extrakce DNA, a proto není vhodná pro typy tkání obsahující vysoký podíl inhibitorů PCR.
Tento protokol byl původně vyvinut Truettem et al. (2000) pro rutinní genotypizaci myších tkání. Od té doby se široce používá v mnoha různých aplikacích díky své nízké ceně, jednoduchosti a rozšiřitelnosti.
Podrobnosti:
Vhodný pro širokou škálu typů tkání, obvykle ze zvířecích zdrojů, ale také z rostlin, hub a bakterií.
V jedné zkumavce se provádí PCR na jeden vzorek.
Lze použít pro několik vzorků nebo více 96jamkových destiček.
Extrakce DNA do 30 minut.
Obsahuje:
- Alkalický lyzační roztok (25 mM NaOH, pH 12)
- Neutralizační pufr (100 mM Tris-HCl, 0,5 mM EDTA, pH 8)
Doporučené použití
Přidejte 75 µl alkalického lyzačního roztoku do 1-2 mm3 vzorku v 0,2 ml zkumavce PCR a inkubujte při 95 ºC po dobu 30 minut. Nechte vychladnout a poté přidejte 75 µl neutralizačního pufru.
Použijte 1-5 µl extraktu DNA jako templát na 20 µl PCR reakce nebo v případě obtížných tkání (např. rostlinné nebo houbové tkáně, peří, krev) nejprve zřeďte 10x-100x ve sterilní destilované vodě nebo vodě PCR kvality, abyste zředili inhibitory PCR. Optimální ředění pro daný typ tkáně lze nejprve stanovit testováním řady ředění.
Skladování a stabilita:
Skladujte uzavřené v původním sáčku při pokojové teplotě.
Vystavení alkalického lyzačního roztoku vzduchu postupně snižuje pH a účinnost tohoto činidla v průběhu času. Skladování po dobu až 6 měsíců při pokojové teplotě by mělo mít minimální škodlivé účinky za předpokladu, že nádoby a sáčky jsou řádně uzavřeny.
Při dlouhodobějším skladování proveďte před použitím test pH a zkontrolujte pH Alkalického lyzačního roztoku.
*obrázky produktu převzaty z oficiálních stránek Bento Lab