Souprava na identifikaci geneticky modifikovaných organismů

Princip GMO experimentů spočívá ve využití dvou různých PCR reakcí se dvěmi různými páry primerů. První pár je specifický pro rostlinnou DNA (množí úsek o velikosti 455 pb genu pro fotosystém II) a slouží jako pozitivní kontrola úspěšné izolace DNA. Druhý pár testuje přítomnost sekvencí charakteristických pro velkou většinu GMO rostlin rozšířených v Severní Americe, Asii a Evropě (jedná se buď o promotorovou sekvenci 35S z květákového mozaikového viru (cauliflower mosaic virus), nebo o sekvenci terminátoru genu pro nopaline synthasu (NOS) z Agrobacterium tumefaciens). Pomocí GMO soupravy, která obsahuje primery navržené proti oběma těmto sekvencím (promotoru i terminátoru), můžete identifikovat až 85% GM potravin.

Souprava na identifikaci geneticky modifikovaných potravin umožní studentům zjistit, zda potraviny, které jsou běžně dostupné v supermarketech, jsou geneticky modifikované či nikoliv.

Studenti si dále osvojí dovednosti izolace DNA z rostlinného materiálu, PCR reakce a elektroforetické separace PCR fragmentů.

Na splnění této úlohy budou studenti potřebovat celkem 4 vyučovací hodiny.

Obsah jednotlivých lekcí

Lekce 1: Teoretický úvod do problematiky (přednáška na téma geneticky modifikovaných organizmů - GM rostliny, živočichové, bakterie, současná legislativa – registr povolených GMO, pravidla nakládání s GMO a jejich produkty); objasnění principu používaných metod; teoretická příprava na nadcházející experimenty.

Experimentální část 1. Izolace DNA (alternativně lze provést i během lekce 2). 

Lekce 2: Příprava PCR reakce.

Lekce 3: Elektroforetická separace PCR fragmentů – příprava gelu, nanášení vzorků, elektroforéza, barvení gelu.

Lekce 4: Analýza a vyhodnocení výsledků.